哺乳动物血液中的葡萄糖称为血糖,血糖是糖在体内的运输形式。血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定,调节失衡时出现高血糖和低血糖。糖尿病、颅内压增加和脱水症等均可引起高血糖;饭后精神紧张会引起生理性高血糖。胰岛 β 细胞增生,胰岛 β 细胞瘤,垂体、肾上腺皮质和甲状腺功能减退以及严重肝病患者均会引起低血糖;饥饿和剧烈运动可引起暂时的低血糖。血糖水平是许多代谢疾病的关键诊断参数,因此血糖的检测在疾病研究和药物开发过程中非常重要。本试剂盒可检测血液样本中葡萄糖含量,原理是葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并产生过氧化氢;过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林和酚缩合成红色醌类化合物,其大吸收峰在 505nm,在一定的浓度范围内葡萄糖含量与505nm吸光度成线性关系,根据标准曲线即可计算出样品中葡萄糖的含量。
酶标仪或可见光分光光度计(能测505nm处的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
恒温箱、低温离心机
去离子水
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多个修饰位点,本身可以呈现多条带,建议查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小;
2、样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作;
3、杂蛋白多,建议处理目的蛋白;
4、抗体特异性不强,建议使用特异性强的抗体;
5、抗体孵育时间过久,建议减少抗体孵育时间;
6、二抗与抗原有交叉反应,建议选择合适的封闭物;
7、二聚体或多聚体存在,建议增加蛋白质变性过程及强度;
8、底物显色与曝光时间过长,建议缩短显色及曝光的时间。
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