过氧化氢酶(Catalase, CAT, EC 1.11.1.6)是一种常见的抗氧化酶,可催化过氧化氢(H2O2)分解为水和氧,普遍存在于含有细胞色素系统的好氧细胞中。过氧化氢对细胞是高度有害的,其积累将导致细胞靶标(例如DNA,蛋白质和脂质)的氧化,从而导致诱变和细胞死亡。通过使用过氧化氢酶从细胞中去除过氧化氢(H2O2),可以防止细胞的氧化损伤。过氧化氢酶在氧化应激相关疾病中的作用已被广泛研究。过氧化氢酶还表现出过氧化物酶活性,其中低分子量醇可用作电子供体。脂肪醇是过氧化氢酶的特异性底物,然而,具有过氧化活性的其它酶不利用这些底物。本试剂盒提供了一种简单易用的比色法,用于分析不同生物样品中过氧化氢酶活性。原理是利用过氧化氢酶的过氧化物酶功能来测定过氧化氢酶的活性。在合适浓度的H2O2存在的条件下,过氧化氢酶与甲醇反应,产生甲醛,生成的甲醛可以与显色物反应,产物可以在540nm处测量吸光度,样本中的过氧化氢酶活性与OD值成正比。
酶标仪或可见分光光度计(能测540 nm处的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
离心机
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
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答:可能的原因有:
1、胶凝的不均匀或聚合不好,建议灌胶前将溶液充分混匀;
2、某些样品盐浓度较高,建议除盐或将样品盐浓度调成一致;
3、缓冲液陈旧,成分改变,可以重配;
4、凝胶下面有气泡,电泳前要先将气泡赶走;
5、电泳时温度过高,可以降低电流或电压;
6、样品中含有不溶性颗粒,建议样品充分搅拌混匀。
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