蔗糖酶（EC 3.2.1.26）是碳水化合物消化吸收的关键酶之一，特异地催化非还原糖中的α-呋喃果糖苷键水解, 具有相对专一性。不仅能催化蔗糖水解生成葡萄糖和果糖 , 也能催化棉子糖水解, 生成密二糖和果糖。蔗糖酶广泛存在于动植物和微生物中，在植物的运输贮藏、碳水化合物代谢中发挥主要作用．并在渗透调节、抗逆性生长繁殖、以及信号传导方面也发挥着重要的作用。本试剂盒提供了一种检测蔗糖酶活性的便捷方法，其原理是蔗糖酶水解蔗糖水解生成还原糖，3,5-二硝基水杨酸与还原糖共热被还原成棕红色的氨基化合物，在540nm有特征吸收峰。在一定范围内酶活力大小与还原糖的量也就是反应液540nm吸光度成正比。测定540nm吸光度的变化可计算蔗糖酶活力。
酶标仪或可见光分光光度计（能测540nm处的吸光度）
水浴锅、制冰机、低温离心机
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
去离子水
匀浆器（如果是组织样本）
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答：可能的原因有：
1、目的蛋白有多个修饰位点，本身可以呈现多条带，建议查阅文献或进行生物信息学分析，获得蛋白序列的修饰位点信息，通过去修饰确定蛋白实际大小；
2、样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂；样本处理时在冰上操作；
3、杂蛋白多，建议处理目的蛋白；
4、抗体特异性不强，建议使用特异性强的抗体；
5、抗体孵育时间过久，建议减少抗体孵育时间；
6、二抗与抗原有交叉反应，建议选择合适的封闭物；
7、二聚体或多聚体存在，建议增加蛋白质变性过程及强度；
8、底物显色与曝光时间过长，建议缩短显色及曝光的时间。
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