过氧化氢(H2O2)是生物体内常见的活性氧分子,是一种活性氧代谢的副产物,主要由超氧化物歧化酶(SOD)和黄嘌呤氧化酶(XO)等催化产生,由过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)等催化降解。过氧化氢不仅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互转化的枢纽。一方面,H2O2可以直接或间接地氧化细胞内核酸, 蛋白质等生物大分子,使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体;另一方面,H2O2也是许多氧化应急反应中的关键调节因子。H2O2可以激活 NF-κB 等因子,这些H2O2相关的信号途径和哮喘、炎症性关节炎、动脉硬化以及神经退行性疾病等许多疾病相关。H2O2也和细胞凋亡、细胞增殖等密切相关。本试剂盒提供了一种简单易用的方法,用于测量各种生物样本中H2O2含量。原理是利用H2O2氧化二价铁离子产生三价铁离子,然后和 xylenol orange(二甲酚橙)在特定的溶液中形成紫色的产物,在580nm 的吸光度与H2O2浓度成正比,从而测定H2O2浓度。
酶标仪或可见分光光度计(能测 580nm处的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
恒温箱、离心机、制冰机
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
10kDa的超滤管(用来去除蛋白)
更新中...
答:如果能够排除下面的几个问题,那么问题多半出现在一抗和抗原制备上。
1、二抗的HRP 活性太强,将底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不稳定,失活;
3、ECL底物没覆盖到相应位置;
4、一抗选择不当;
5、二抗失活。
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