黄嘌呤氧化酶(EC 1.17.3.2)或黄嘌呤氧化还原酶是人体中嘌呤分解代谢的末端酶,催化次黄嘌呤羟基化为黄嘌呤,然后催化生成尿酸。当作为NADH氧化酶时,XOD是超氧化物(O2-)的生成物,超氧化物(O2-)是一种强大的活性氧(ROS)。XOD也是核苷酸 代谢的关键酶之一。XOD主要分布于哺乳动物的心、肺、肝脏等组织中,当肝功能受损时,XOD大量释放到血清 中,对肝损害的诊断具有特异性的意义。本试剂盒提供一种简单易用的测定法,用于检测各种生物样本中XOD活性,其原理是XOD催化黄嘌呤产生超氧阴离子,超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-在对氨基苯磺酰胺和萘乙二胺盐酸盐的作用下,生成红色的偶氮化合物,在540nm处有特征吸收峰,根据其生成量可反映XOD活性的大小。
酶标仪或可见分光光度计(能测540nm处的吸光度)及水浴锅
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
低温离心机、制冰机
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
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答:可能的原因有:
1、胶浓度不对,不同浓度的胶跑出的蛋白条带的位置可能有所偏差,可以调整浓度;
2、抗体孵育不充分,建议增加抗体浓度,延长孵育时间;
3、酶失活,建议直接将酶和底物进行混合,如果不显色则说明酶失活了。选择在有效期内、有活性的酶联物;
4、目的蛋白存在翻译后修饰或剪切体,建议查询相关文献确定;
5、标本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建议设置阳性对照比对结果,增加标本上样量。
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