锌是必需的微量元素之一,在胰岛素和卟啉代谢中也起重要作用。本试剂盒提供了一种简单的检测方法,用于检测血清样本中锌的含量,其原理是在pH8.5-9.5的溶液中,Zn2+与锌试剂生成蓝色配位化合物,在620nm有大吸收峰。在一定范围内620nm处吸光值与样品中锌的浓度成正比,测定620nm处吸光值即可计算样品中锌的浓度。
酶标仪或可见分光光度计(能测620nm处的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
低温离心机、水浴锅
去离子水、无水乙醇
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多个修饰位点,本身可以呈现多条带,建议查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小;
2、样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作;
3、杂蛋白多,建议处理目的蛋白;
4、抗体特异性不强,建议使用特异性强的抗体;
5、抗体孵育时间过久,建议减少抗体孵育时间;
6、二抗与抗原有交叉反应,建议选择合适的封闭物;
7、二聚体或多聚体存在,建议增加蛋白质变性过程及强度;
8、底物显色与曝光时间过长,建议缩短显色及曝光的时间。
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