羟基自由基•OH是氢氧根离子(OH-)的中性形式,具有高反应性(容易变成羟基)。羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子,造成细胞结构和功能受损,进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一,在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。本试剂盒可检测各种生物样本的羟自由基清除能力,其原理是试剂二/Fe2+ 通过Fenton反应产生羟自由基,水杨酸能有效捕捉产生的羟自由基并与其反应生成有色物质2,3-二羟基苯甲酸,在520nm处有大吸收峰,加入具有清除能力的物质后,有色物质便会减少,从而可以根据吸光值的数值判断样品清除羟自由基的能力。
酶标仪或可见分光光度计(能测520nm处的吸光度)
恒温箱、制冰机、低温离心机
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
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答:可能的原因有:
1、胶浓度不对,不同浓度的胶跑出的蛋白条带的位置可能有所偏差,可以调整浓度;
2、抗体孵育不充分,建议增加抗体浓度,延长孵育时间;
3、酶失活,建议直接将酶和底物进行混合,如果不显色则说明酶失活了。选择在有效期内、有活性的酶联物;
4、目的蛋白存在翻译后修饰或剪切体,建议查询相关文献确定;
5、标本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建议设置阳性对照比对结果,增加标本上样量。
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