乙酸激酶(Acetate kinase)是在乙酸生成过程中的关键酶，它控制着乙酸的终生成，广泛存在于各类生物体内。ACK催化乙酰磷酸和ADP生成乙酸和ATP的可逆反应，在生物体的碳源代谢和能量代谢中发挥着重要的作用，尤其是在古细菌甲烷合成代谢中起着中枢作用。本试剂盒提供了一种简单、方便、快速的ACK活性检测方法，其原理是：ACK催化乙酸钠和ATP生成乙酰磷酸和ADP，丙酮酸激酶催化ADP和PEP生成ATP和丙酮酸，乳酸脱氢酶催化丙酮酸和NADH生成乳酸和NAD+。NADH在340nm处有特征吸收峰，而NAD+没有，在340nm下测定NADH生成NAD+速率，即可反映ACK活性。
酶标仪或紫外分光光度计（能测340nm处的吸光度）
96孔UV微孔板或微量石英比色皿、可调节式移液枪及枪头
水浴锅、制冰机，低温离心机
去离子水
匀浆器（如果是组织样本）
更新中...
答：可能的原因有：
1、目的蛋白有多个修饰位点，本身可以呈现多条带，建议查阅文献或进行生物信息学分析，获得蛋白序列的修饰位点信息，通过去修饰确定蛋白实际大小；
2、样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂；样本处理时在冰上操作；
3、杂蛋白多，建议处理目的蛋白；
4、抗体特异性不强，建议使用特异性强的抗体；
5、抗体孵育时间过久，建议减少抗体孵育时间；
6、二抗与抗原有交叉反应，建议选择合适的封闭物；
7、二聚体或多聚体存在，建议增加蛋白质变性过程及强度；
8、底物显色与曝光时间过长，建议缩短显色及曝光的时间。
Copyright ©湖北普美生物科技有限公司 All Rights Reserved. 工信部备案：鄂ICP备17001029号-1 技术支持：武汉微盟
