谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase,GS;EC 6.3.1.2)是一种控制氮代谢的酶,主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。在高等植物的研究中,GS也常被定义为植物氨同化所必需的酶,人谷氨酰胺合成酶叫做hGS。本试剂盒提供了一种简单的检测方法检测生物样本中谷氨酰胺合成酶(GS)的活性水平。其原理是GS在ATP和Mg2+存在下,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与铁形成的络合物在540nm处有大吸收峰,于540nm测定吸光度,即可计算谷氨酰胺合成酶(GS)活力。
酶标仪或可见分光光度计(能测540nm处的吸光度)及水浴锅
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
恒温箱、低温离心机、制冰机
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
更新中...
答:如果能够排除下面的几个问题,那么问题多半出现在一抗和抗原制备上。
1、二抗的HRP 活性太强,将底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不稳定,失活;
3、ECL底物没覆盖到相应位置;
4、一抗选择不当;
5、二抗失活。
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