
乙酰胆碱酯酶(AchE)属于丝氨酸水解酶,广泛存在于各种动物组织和血清中。AchE催化乙酰胆碱(Ach)水解,在神经传导调节中起重要作用。本试剂盒提供了一种简便的检测方法可检测生物体内AchE活性,其原理是:AchE催化Ach水解生成胆碱,胆碱与二硫对硝基苯甲酸(DTNB)作用生成5-巯基-硝基苯甲酸(TNB);TNB在412nm处有吸收峰,通过测定412nm吸光度增加速率,计算AchE活性。



酶标仪或可见光分光光度计(能测412nm处的吸光度)
恒温箱、制冰机、低温离心机
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)

1. 实验过程中请穿戴实验服、口罩和乳胶手套。请按照生物实验室的国家安全规定进行实验,尤其是在检测血样或其他体液时。
2. 本试剂盒仅用于实验室科学研究,如果本试剂盒用于临床诊断或任何其他用途,我们将不对任何后果负责。
3. 本试剂盒应在有效期内使用,并请严格按照说明书进行存储。
4. 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用;否则,可能导致结果异常。
5. 勤换吸头,避免各组分之间的交叉污染。
更新中...
通常可以按比例缩小,如说明书中是约0.1g组织加1ml提取液,可以等比例缩小,如0.05g组织加0.5ml提取液提取。后续操作不变。此外,对于数量少、酶活性低的样品,一方面可以减少提取液体积,另一方面还可以延长反应时间。
1. 样品尽可能液氮速冻后保存在-80℃冰箱中,以减少酶活性变化。粗酶液提取全程应该保持低温,包括样品称量应该迅速完成,粗酶液提取应该在冰浴中进行,离心应该在4℃左右进行,测定过程中粗酶液应该保存在冰浴中。此外,粗酶液提取后应该尽快完成测定,通常不可以留到第二天测定。
2. 在对样本进行提取时,加完提取液好不要用液氮研磨,而且样本不要反复冻融,这样会破坏酶的活性。冻融会影响蛋白的三级结构,对酶活性有一定影响,对于动植物组织,可以直接研磨,对于细胞或细菌之类的样品,可以使用超声波。
3. 提取要根据不同样本特点进行,原则是提取充分和保持活性。对于有细胞壁的样品,一定要注意破壁方法;对于分布于特定细胞器中的成分,原则上先分离该细胞器,然后再从收集的细胞器中进一步提取需要的成分。对于存在于膜上的成分,要注意如何分离,去垢剂的使用要小心,以避免酶失活。使用超声波破碎,一定要防止温度升高导致失活。特殊样品可以查阅相关文献,参考前人提取方法,或者咨询我们的研发专家。
Copyright ©湖北普美生物科技有限公司 All Rights Reserved. 工信部备案:鄂ICP备17001029号-1 技术支持:武汉微盟