ATP-柠檬酸裂解酶(ATP-citrate lyase,ACL;EC4.1.3.8)是催化柠檬酸生成乙酰辅酶A的关键胞质酶,其催化产生的乙酰辅酶A是合成脂肪酸与胆固醇等脂类物质的主要原料。可用于脂肪酸合成和碳链延长、黄酮类物质合成、氨基酸合成等,并可参与相关重要蛋白的修饰作用,是体内能源物质代谢的枢纽性物质。试剂盒提供了一种简单的比色法来检测生物样本中ACL活性,其原理是ACL 在ATP和辅酶 A 存在的情况下催化柠檬酸裂解为乙酰辅酶 A、草酰乙酸、ADP及无机磷。通过测定无机磷增加速率来确定ACL活性。
酶标仪或分光光度计(能测660nm处的吸光度)及恒温箱
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
制冰机、低温离心机
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
更新中...
答:如果能够排除下面的几个问题,那么问题多半出现在一抗和抗原制备上。
1、二抗的HRP 活性太强,将底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不稳定,失活;
3、ECL底物没覆盖到相应位置;
4、一抗选择不当;
5、二抗失活。
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