低密度脂蛋白为血清蛋白之一,主要由肝脏合成,是一种运载胆固醇进入外周组织细胞的脂蛋白颗粒。低密度脂蛋白能够进入动脉壁细胞并带入胆固醇,还可被氧化成氧化低密度脂蛋白。当低密度脂蛋白,尤其是氧化修饰的低密度脂蛋白(OX-LDL)过量时,它携带的胆固醇便积存在动脉壁上,久了容易引起动脉硬化。因此低密度脂蛋白被称为"坏的胆固醇"。低密度脂蛋白与冠心病的发生和动脉粥样硬化损伤呈正相关,是脂类疾病分类和风险预测的一个重要指标。本试剂盒可检测生物体内LDL-C含量。其原理是:用沉淀剂分离血清中的低密度脂蛋白胆固醇,利用胆固醇酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇(FC)和游离脂肪酸(FFA),从而把胆固醇酯转化为FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-胆甾烯酮和 H2O2;再利用过氧化物酶催化 H2O2氧化 4-氨基安替比林和酚,生成红色醌类化合物;在 500nm 有特征吸收峰。
酶标仪或可见分光光度计(能测500nm处的吸光度)
恒温箱、制冰机、低温离心机
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
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答:可能的原因有:
1、胶浓度不对,不同浓度的胶跑出的蛋白条带的位置可能有所偏差,可以调整浓度;
2、抗体孵育不充分,建议增加抗体浓度,延长孵育时间;
3、酶失活,建议直接将酶和底物进行混合,如果不显色则说明酶失活了。选择在有效期内、有活性的酶联物;
4、目的蛋白存在翻译后修饰或剪切体,建议查询相关文献确定;
5、标本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建议设置阳性对照比对结果,增加标本上样量。
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