
一氧化氮(Nitric Oxide,NO)是一种极不稳定的生物自由基,分子小,结构简单,可快速透过生物膜扩散,作为一种新型的生物信使分子,在细胞间及细胞内传递信号,在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。其广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中,特别是神经组织中较丰富。NO易被氧化成亚硝酸盐和硝酸盐,因此,通常要测定亚硝酸盐和硝酸盐的总量来推算出总的一氧化氮的量。本试剂盒采用改进的格里斯法将硝酸盐还原为亚硝酸盐后,即可准确测定NO的生成量。格里斯分析的机理概括为重氮类之间的偶氮耦合,重氮类是由磺胺和 NO2-和 N-(1-萘基)乙二胺二盐酸盐产生的,产物在540nm处有特征吸收峰,测定其吸光值,可以计算NO含量。



酶标仪或分光光度计(能测 540nm处的吸光值)及恒温培养箱
96孔板或微量比色皿、可调节式移液枪及枪头
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
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可能的原因有:
1.仪器校准不当。
2.检测波长设置错误。
3.反应孔中有气泡或杂质。
生化试剂盒初一般是采用分光光度法,用分光光度计测量吸光度。微量法是随着酶标仪和微孔板的普及,改用酶标仪和酶标板测量吸光度。除了仪器不同以外,主要差别是反应体系更小,一般不超过250ul,计算公式的系数会有一定变化。
d:由比色皿光径,1cm改为96孔板直径,0.5 cm(也有0.6cm的)
但对于标明只用分光光度法的试剂盒,不建议使用酶标仪进行酶活性测定。非要用酶标仪进行检测,一定要按照说明书将反应体系缩小至250微升左右,加样表中各试剂体积一定要按照比例缩小。不过,因为初研发时是按照分光光度法进行设计和调整的,用户改变测定仪器后,我们不保证能够取得好的结果。
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