
α-葡萄糖苷酶(α-GC;EC 3.2.1.20)是一种重要的糖苷水解酶,广泛存在于动植物及微生物和培养细胞中,主要用于催化芳基或烃基与糖基之间的α-葡萄糖苷键的水解,释放葡萄糖,与细胞识别和一些信号分子产生密切相关,具有重要的生物学和工业应用。因此开发α-GC抑制剂在治疗糖尿病相关研究、天然产物开发、药物发现和基础酶学研究领域扮演着至关重要的角色。本试剂盒提供了一种简单易用的比色法,用于分析各种生物样品对中α-GC的抑制效果。其原理是α-GC分解对-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有大吸收峰,因此,400nm处吸光值会升高,加入抑制剂后会抑制α-葡萄糖苷酶酶活,吸光度上升的速率会降低,根据吸光度差值可计算出抑制率。



酶标仪或可见光分光光度计(能测400nm处的吸光度)及水浴锅
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
离心机、制冰机
去离子水
匀浆器或研磨仪(如果是组织样本)
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可能的原因有:
1.仪器校准不当。
2.检测波长设置错误。
3.反应孔中有气泡或杂质。
1)对照的设置对于测定结果的可靠性影响很大,尤其是待测液中含有与测定原理中拟直接检测的产物一样的物质时。通过设置对照,不仅可以排除本底的影响,而且可以排除其它一些未知的复杂影响,保证测定结果可靠。
(2)首先考虑的是保证测定结果可靠。因此,有些试剂盒只设空白对照,但是有些试剂盒每个样品都设对照。其中后者是根据反应原理,为了排除可能的复杂影响。
关于设置样本对照是否造成浪费。首先必须要保证测定结果可靠,因为如果测定结果不可靠,就不可能得到正确结论,那么所有的研究投入,包括前期的样品培养与处理、购买试剂盒的费用和用户的时间与精力,都会浪费。为此,我们精心权衡,在必要时每个样品都设对照。
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