
研究背景:普美生物的糖类三合一(果糖/蔗糖/葡萄糖)检测套装提供了用于常规糖类检测常见三种指标:果糖、蔗糖、葡萄糖的检测试剂。果糖是一种为常见的己酮糖,是葡萄糖的同分异构体,以游离状态大量存在于水果的浆汁和蜂蜜中,能与葡萄糖结合生成蔗糖。果糖是甜的单糖,广泛应用于食品、医药、保健品生产中。蔗糖是植物光合作用的主要产物,也是糖分运输和储藏的主要形式。因此,测定蔗糖含量对于植物糖代谢具有重要意义。葡萄糖是一种主要的生物燃料源,用于产生通用的能量分子ATP。葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物,而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。葡萄糖水平异常与几种代谢功能异常有关,如低血糖、高血糖和糖尿病。就哺乳动物而言,葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的唯一能源,而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。由于葡萄糖在代谢中的重要性,葡萄糖水平是许多代谢紊乱的关键诊断参数。葡萄糖水平异常与几种代谢功能异常有关,如低血糖、高血糖和糖尿病。
检测原理:在酸性条件下果糖与间苯二酚反应,生成有色物质,在480nm下有特征吸收峰。在一定的浓度范围内,果糖含量与480nm吸光度成线性关系,测480nm处的吸光值,即可计算样品果糖含量。
样本中的蔗糖先用碱与样品共热,破坏其中的还原糖。然后在酸性条件下将蔗糖水解生成葡萄糖和果糖,果糖进一步与间苯二酚反应,生成有色物质,在480nm下有特征吸收峰,蔗糖含量与颜色的深浅成正比。
葡萄糖氧化酶催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并产生过氧化氢;过氧化物酶催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林和酚缩合成红色醌类化合物,其大吸收峰在505nm,在一定的浓度范围内葡萄糖含量与505nm吸光度成线性关系,根据标准曲线即可计算出样品中葡萄糖的含量。
检测范围和灵敏度:
果糖检测范围:0.078-5mg/mL(标准品浓度) 灵敏度:0.078mg/mL(标准品浓度)
蔗糖检测范围:0.078-5mg/mL(标准品浓度) 灵敏度:0.039mg/mL(标准品浓度)
葡萄糖检测范围:0.0625-4mmol/L(标准品浓度) 灵敏度:0.0156mmol/L(标准品浓度)
📊 检测意义:食品品质控制、人体糖代谢功能评估与疾病诊断、营养学研究。
🧪 适用样本:动植物组织、细胞、细菌、血清(浆)、培养上清、果汁、尿液、饮料等液体样本。



📋 酶标仪或可见光分光光度计(能测480nm和505nm处的吸光度)及水浴锅、96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头、低温离心机、制冰机、去离子水、PBS、匀浆器。(如果是组织样本)
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可能的原因有:
1.仪器校准不当。
2.检测波长设置错误。
3.反应孔中有气泡或杂质。
可能的原因有:
1.加样误差或漏加试剂。
2.样本中目标物质浓度过高、样本未充分稀释。
3.反应时间过长或温度过高。
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