SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5x)
货号:PMK0012
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价格:
10.00
规格:
1ml
5×1ml
15ml
货期:
现货
本产品4℃运输,保存于4℃,保质期 12个月。
Details
产品详情
  • 产品简介

    SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer,5X),是一种经过改良的以溴酚蓝为染料,5倍浓缩的蛋白上样缓冲液。可以用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。

  • 使用说明

    1.在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE上样缓冲液(5X)。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。

    2.按照每4微升蛋白样品加入1微升蛋白上样缓冲液(5X)的比例,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(5X)。

    3.100℃或沸水浴加热3-5分钟,以充分变性蛋白。

    注意:如果起始时细胞或组织的用量较大,基因组DNA含量较高,煮沸3-5分钟后有可能仍然比较粘稠或者有粘稠状的半透明物体。此时需要再煮沸5-10分钟或者加入适量稀释成1X的蛋白上样缓冲液后再煮沸3-5分钟。充分煮沸后一方面可以使结合在基因组DNA上的蛋白充分释放,同时会导致基因组DNA的部分断裂从而使粘稠感消失,这样就不会影响后续的上样操作了。

    4.冷却到室温后,直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。

    5.通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。


  • 注意事项

    SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)中含少量DTT,有轻微刺激性气味,但不含剧毒的巯基乙醇。

    SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)必须完全溶解后再使用。

    本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

    为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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Product Q&A FAQ
产品问答FAQ
  • Western Blot(WB)实验中有很多杂带咋回事?

    答:可能的原因有:

    1、目的蛋白有多个修饰位点,本身可以呈现多条带,建议查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小;

    2、样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作;

    3、杂蛋白多,建议处理目的蛋白;

    4、抗体特异性不强,建议使用特异性强的抗体;

    5、抗体孵育时间过久,建议减少抗体孵育时间;

    6、二抗与抗原有交叉反应,建议选择合适的封闭物;

    7、二聚体或多聚体存在,建议增加蛋白质变性过程及强度;

    8、底物显色与曝光时间过长,建议缩短显色及曝光的时间。


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