HRP快速标记试剂盒-湖北普美生物科技有限公司

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产品详情

产品简介

辣根过氧化物酶（HRP）是一种 44,173.9 道尔顿糖蛋白，带有6个赖氨酸残基，可以与待标记分子结合。当与适当的底物一起孵育时，会生成带有颜色，荧光或发光衍生物的标记分子偶联体，我们可以对其进行检测和定量分析。HRP 通常用于偶联物中，以确定分子靶标的存在。HRP 具有单体特性，能简便地生成有色物，常用于ELISA和免疫组织化学等实验。本试剂盒可直接对蛋白质、多肽及其它含游离氨基的配体上标记HRP。试剂盒中HRP已预先活化，可直接用于偶联实验。
标记原理：采用改良的过碘酸钠法活化辣根过氧化物酶（HRP），经过活化的HRP可以与待标记物的游离氨基结合，发生希夫碱反应（Schiff's base reaction），从而实现与蛋白的偶联。
应用举例：直标一抗在免疫实验中无需二抗，免去繁琐的孵育和洗涤步骤，节省时间。
产品内容
自备耗材

可调节式移液枪及枪头
离心机（离心力可到12000×g）
1×PBS 7.4，去离子水

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已发表文献

Product Q&A FAQ

产品问答FAQ

elisa实验高背景信号

解决方案：
1.优化封闭剂浓度和时间。
2.调整抗体浓度。
elisa实验低信号或无信号

解决方案：
1.增加包被抗原或抗体浓度。
2.更换新抗体。
3.确保底物新鲜。
Western Blot（WB）实验中背景高咋回事?

答：可能的原因有：
1、膜没有完全均匀湿透,建议使用100% methanol浸透膜；
2、洗膜不充分，可以增加洗液体积和洗涤次数；
3、电极不平衡或者加样位置偏斜，可以调整电极和加样；
4、封闭物用量不足，可以提高封闭物浓度，孵育时保证封闭液完全浸没转印膜；
5、封闭物使用不当，比如检测生物素标记的蛋白时不可用脱脂奶粉封闭；
6、封闭时间不够，一般情况下室温37度封闭1小时以上或者4度封闭过夜；
7、抗体非特异性结合，可以降低抗体浓度，减少孵育时间；
8、一抗稀释度不适宜，可以对抗体进行滴度测试，选择适宜的抗体稀释度；
9、一抗孵育的温度偏高，建议4℃结合过夜；
10、抗体浓度过高或洗涤不够，建议降低抗体浓度，增加洗涤次数和时间；
11、化学显色底物过多，建议按说明书加入适量的显色底物。
Western Blot（WB）实验中我的目的带很弱，如何加强？

1、可以加大抗原上样量，这是主要的；
2、也可以将一抗稀释比例降低；
3、还可以延长曝光时间。