本产品可显影蛋白Marker(13-154kDa)为预染可曝光蛋白marker，由8种高纯度的非预染重组蛋白和4种预染重组蛋白组成，指示的蛋白质分子量大小为13-154kDa（13、22、28、38、50、62、70、78、113、140、154kDa），其中70kDa为玫红色预染条带，13、28、140kDa均为蓝色预染条带，方便动态观察蛋白质电泳状态或判断蛋白质转膜效果。8条非预染重组蛋白可以结合几乎所有类型抗体（鸡抗体除外），可与目的蛋白质同时结合抗体并经ECL或其他方式显色。
产品编号 | 名称 | 规格 |
PMK0829- 1 | 可显影蛋白Marker | 250ul |
PMK0829-2 | 缓冲液 | 1ml |
1.本产品为即用型，无需加入还原剂或加热，取-20℃保存的可显影蛋白Marker于室温下解冻后轻轻充分混匀后即可使用；
2.由于市面上抗体效价有差异，建议实验室在初次使用本产品时可以根据自身的实验条件和实验习惯通过预实验确定合适的稀释比例，这样既可以节约成本，同时也可获得效果更佳的实验图片；（建议仅供参考：对于使用一抗为鼠源抗体建议取本产品5ul与实验样品同时进行蛋白电泳；对于使用一抗为兔源抗体建议将本产品利用提供的缓冲液稀释4倍后取5ul与实验样品同时进行蛋白电泳）
3.可显影蛋白Marker使用完后及时保存于-20℃（建议分装保存使用）。
1.可显影蛋白Marker不能100℃加热或者煮沸，否则会导致蛋白条带发生降解或失去效果；
2.若可显影蛋白Marker显色条带较粗时，可以用缓冲液适当稀释后使用，稀释后Marker中4个预染蛋白条带颜色会相应变弱，属于正常现象；
3.由于市面上抗体特异性参差不齐，所以遇到预染条带被显影属于正常现象，根据位置大小可以明显区分；
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
5.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
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答：如果能够排除下面的几个问题，那么问题多半出现在一抗和抗原制备上。
1、二抗的HRP 活性太强，将底物消耗光；
2、ECL底物中H2O2不稳定，失活；
3、ECL底物没覆盖到相应位置；
4、一抗选择不当；
5、二抗失活。
答：可能的原因有：
1、膜没有完全均匀湿透,建议 使用100% methanol浸透膜；
2、洗膜不充分，可以增加洗液体积和洗涤次数；
3、电极不平衡或者加样位置偏斜，可以调整电极和加样；
4、封闭物用量不足，可以提高封闭物浓度，孵育时保证封闭液完全浸没转印膜；
5、封闭物使用不当，比如检测生物素标记的蛋白时不可用脱脂奶粉封闭；
6、封闭时间不够，一般情况下室温37度封闭1小时以上或者4度封闭过夜；
7、抗体非特异性结合，可以降低抗体浓度，减少孵育时间；
8、一抗稀释度不适宜，可以对抗体进行滴度测试，选择适宜的抗体稀释度；
9、一抗孵育的温度偏高，建议4℃结合过夜；
10、抗体浓度过高或洗涤不够，建议降低抗体浓度，增加洗涤次数和时间；
11、化学显色底物过多，建议按说明书加入适量的显色底物。
答：可能的原因有：
1、胶凝的不均匀或聚合不好，建议灌胶前将溶液充分混匀；
2、某些样品盐浓度较高，建议除盐或将样品盐浓度调成一致；
3、缓冲液陈旧，成分改变,可以重配；
4、凝胶下面有气泡,电泳前要先将气泡赶走；
5、电泳时温度过高，可以降低电流或电压；
6、样品中含有不溶性颗粒，建议样品充分搅拌混匀。
答：可能的原因有：
1、胶浓度不对，不同浓度的胶跑出的蛋白条带的位置可能有所偏差，可以调整浓度；
2、抗体孵育不充分,建议增加抗体浓度，延长孵育时间；
3、酶失活，建议直接将酶和底物进行混合，如果不显色则说明酶失活了。选择在有效期内、有活性的酶联物；
4、目的蛋白存在翻译后修饰或剪切体，建议查询相关文献确定；
5、标本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低，建议设置阳性对照比对结果，增加标本上样量。
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