10%SDS-PAGE快速配胶试剂盒(红色)
货号:PMK1014A
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价格:
120.00
规格:
50T
货期:
现货
本产品4 ℃运输,保存于4℃,保质期 12个月。
Details
产品详情
  • 产品简介

    本试剂盒提供了简单又快速的10% SDS-PAGE彩色(红色)凝胶配制试剂,采用上层胶(也称浓缩胶、积层胶)和下层胶(也称分离胶)的预混配方,只需加入改良型促凝剂即可快速制备凝胶,避免的传统制胶法中TEMED的恶臭味,保护了实验人员的身体健康,可在短时间内制备多块凝胶,无需计算所需溶液量,无需稀释,操作简便。且使用本产品所配置的上层胶带有颜色(红色),使得蛋白点样孔清晰呈现,实现了加样过程的可视化,极大的提高了加样效率,有利于点样和控制电泳进程。本产品上层胶中的(红色)染料可在上层胶中稳定存在,不会随着电泳而迁移至下层胶,不会影响电泳和蛋白染色效果,电泳完成后也便于识别上层胶并切除,不影响后续Western Blot等实验。

    本产品的改良型促凝剂具有更好的稳定性和催化效能,配制过程中无需额外添加TEMED。为确保实验效果和方便吸取使用,已开盖使用过的改良型促凝剂可置于4°C保存至少3个月。

    本试剂盒可制备厚度0.75mm常规尺寸的凝胶50块,具体配制的凝胶块数量与凝胶的厚薄以及凝胶大小有关。


  • 使用说明

    (以一块0.75/1.0/1.5mm的mini胶为例)

    1. 取等体积下层胶溶液和下层胶缓冲液冲液,各2.0/2.7/4.0mL,轻轻混匀。

    2. 向步骤1的混合溶液中加入40/60/80μl的改良型促凝剂,轻轻混匀。

    3. 将步骤2的混合溶液注入制胶玻璃板中,使液面和短玻璃板上沿之间的距离比梳齿长0.5cm即可,加入适量水或醇(如乙醇、异丙醇等)覆盖于下层胶之上。(此溶液为过量,请勿全部注入,可留少许以判断凝胶状态)

    4. 待下层胶凝固后,倒去上层水或醇。(当水或醇和胶之间有一条折射线时,说明胶已凝固)

    5. 取等体积上层胶溶液和彩色上层胶缓冲液,各0.5/0.75/1.0mL,轻轻混匀。(由于染料的特殊理化性质,使用前请摇匀)

    6. 向步骤5的混合溶液中加入10/15/20μl的改良型促凝剂,轻轻混匀。

    7. 将步骤6的混合溶液注入制胶玻璃板中,插入梳齿。

    8. 待上层胶凝固后,拔去梳齿即可用于电泳。


  • 注意事项

    1. 请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液。
    2. 本产品制备出的上层胶和下层胶与传统的浓缩胶和分离胶配方一致,针对 20-100kDa 的蛋白都能有很好的浓缩和分离效果,如果针对更小分子量的蛋白,建议选用普美克的 12.5% SDS-PAGE 彩色凝胶快速配制试剂盒(PMK1015)效果更好;针对更大分子量的蛋白,建议选用普美克的 8% SDS-PAGE 彩色凝胶快速配制试剂盒(PMK1016)效果更好。
    3. 改良型促凝剂的使用量仅作参考,实际用量可根据个人实验习惯和经验调整,加入较多量的促凝剂可加速凝胶,反之亦然。
    4. 凝胶速度与温度有显著的正相关性。同等条件下,温度越高,凝胶速度越快,室温过高时建议适当减小改良型促凝剂的用量,室温较低时,可适当延长凝胶时间。
    5. 本产品已加入适量 TEMED 的替代品,如需进一步加速 凝胶,临配胶前可按需补充适量 TEMED。
    6. 在配胶之前,使胶溶液及缓冲液平衡到室温(如室温放置几分钟),可有效避免凝胶中气泡的形成。
    7. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
    8. 本产品仅限于专业人员的科学研究使用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

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Product Q&A FAQ
产品问答FAQ
  • Western Blot(WB)实验中有很多杂带咋回事?

    答:可能的原因有:

    1、目的蛋白有多个修饰位点,本身可以呈现多条带,建议查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小;

    2、样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作;

    3、杂蛋白多,建议处理目的蛋白;

    4、抗体特异性不强,建议使用特异性强的抗体;

    5、抗体孵育时间过久,建议减少抗体孵育时间;

    6、二抗与抗原有交叉反应,建议选择合适的封闭物;

    7、二聚体或多聚体存在,建议增加蛋白质变性过程及强度;

    8、底物显色与曝光时间过长,建议缩短显色及曝光的时间。


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