考马斯亮蓝染色试剂盒(常规法)
货号:PMK0493
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价格:
150.00
规格:
500ml
货期:
次日货
本产品常温运输,保质期 12个月。
Details
产品详情
  • 产品简介

    使用本试剂盒,采用常规染色脱色方法累计时间达到2-3小时后可以观察到蛋白条带;采用快速染色脱色方法20分钟左右即可观察到蛋白条带。观察到清晰的蛋白条带则需染色脱色更长时间。本试剂盒中的染色液和脱色液经过改良,不含有毒的甲醇,但含有刺激性气味的乙酸

  • 使用步骤

    1. 常规染色脱色方法:

    a. 电泳结束后,取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中,确保染色液可以充分覆盖凝胶。

    b. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温染色1小时或更长时间。具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。

    c. 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。

    d. 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液,确保脱色液可以充分覆盖凝胶。

    e. 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动,室温脱色4-24小时。期间更换脱色液2-4次,直至蓝色背景基本上全部被脱去,并且蛋白条带染色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1-2小时后即可出现。

    f. 完成脱色后,可以把凝胶保存在水中,用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨,可以把胶保存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。

    2. 快速染色脱色方法:

    a. 电泳结束后,取胶放入适量考马斯亮蓝染色液中,微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾,立即停止加热。

    通常对于胶浓度大于10%的胶比较坚韧,在发生煮沸时不易破损;对于胶浓度小于10%的胶,宜尽量避免煮沸,以免出现胶碎裂的情况。

    b. 随后在染色液温度较高的情况下,在室温摇床上摇动5-10分钟。

    c. 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3次。

    d. 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液,确保染色液可以充分覆盖凝胶。

    e. 微波炉加热至接近沸腾或刚刚沸腾,立即停止加热。

    f. 随后在脱色液温度较高的情况下,在摇床上摇动5-10分钟。此时通常可以观察到比较清楚的蛋白条带。

    g. 更换新鲜的脱色液,重复步骤e和步骤f,直至蓝色背景基本上全部被脱去,蛋白条带染色效果达到预期。

    h. 完成脱色后,可以把凝胶保存在水中,用于后续的拍照等。保存在水中的凝胶会发生溶涨。如需避免溶涨,可以把胶保存在含20%甘油的水中。长期保存可以制备干胶。

  • 注意事项

    1.可以使用枪头盒或适当大小的培养皿作为染色和脱色的容器。

    2.本染色液和脱色液呈酸性,有轻微腐蚀性,使用时请作必要防护

    3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    4.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。

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Product Q&A FAQ
产品问答FAQ
  • Western Blot(WB)实验中蛋白条带位置(大小)不对咋整?

    答:可能的原因有:

    1、胶浓度不对,不同浓度的胶跑出的蛋白条带的位置可能有所偏差,可以调整浓度;

    2、抗体孵育不充分,建议增加抗体浓度,延长孵育时间;

    3、酶失活,建议直接将酶和底物进行混合,如果不显色则说明酶失活了。选择在有效期内、有活性的酶联物;

    4、目的蛋白存在翻译后修饰或剪切体,建议查询相关文献确定;

    5、标本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建议设置阳性对照比对结果,增加标本上样量。


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