Tris-甘氨酸电泳缓冲液(10x)用于Tris-HCl缓冲系统的SDS-PAGE时的电泳缓冲液,适用于Tris-HCl缓冲系统的聚丙烯酰胺凝胶,不适合用于Hepes等缓冲体系的聚丙烯酰胺凝胶。本产品为10倍浓缩溶液,加入超纯水或去离子水稀释为Tris-甘氨酸电泳缓冲液(1X)即可使用。
本电泳缓冲液含有SDS,适用于变性胶蛋白电泳,不适用于非变性蛋白电泳。本电泳缓冲液可以回收作为外槽电泳液,回收后可以再使用1-2次
量取100ml Tris-甘氨酸电泳缓冲液(10x),倒入到一洁净的量筒中,加入超纯水或去离子水混匀并定容到1升后即为Tris-甘氨酸电泳缓冲液(1x);也可根据需要自行量取一定量的Tris-甘氨酸电泳缓冲液(10x)进行配制。具体使用方式按照相应实验需要直接使用即可。回收后的电泳液可室温保存,通常室温可保存2-3天。
配制好的电泳液使用时间不宜超过两周。
低温放置或者气温较低时运输很可能会出现沉淀,通常室温磁力搅拌约10-30分钟可以让沉淀完全溶解。
回收的电泳液可以作为外槽电泳液重复使用1-2次,但为了取得佳的电泳效果,应使用没有用过的电泳液。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多个修饰位点,本身可以呈现多条带,建议查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小;
2、样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作;
3、杂蛋白多,建议处理目的蛋白;
4、抗体特异性不强,建议使用特异性强的抗体;
5、抗体孵育时间过久,建议减少抗体孵育时间;
6、二抗与抗原有交叉反应,建议选择合适的封闭物;
7、二聚体或多聚体存在,建议增加蛋白质变性过程及强度;
8、底物显色与曝光时间过长,建议缩短显色及曝光的时间。
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