Tris-HCl平衡盐缓冲液,简称TBS,是常用于生物学研究的一种缓冲溶液,有很强的缓冲能力,有助于保持恒定的pH值,对很多酶反应是惰性的。TBS缓冲液主要应用于免疫组化、原位杂交、ELISA等实验,清洗免疫印迹实验中非特异性结合的抗体等。本产品主要组分为10mM Tris,150mM NaCl,pH 7.0-7.4(25℃)。使用时将每袋干粉彻底溶解于2000ml双蒸水后即可使用。
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答:可能的原因有:
1、胶浓度不对,不同浓度的胶跑出的蛋白条带的位置可能有所偏差,可以调整浓度;
2、抗体孵育不充分,建议增加抗体浓度,延长孵育时间;
3、酶失活,建议直接将酶和底物进行混合,如果不显色则说明酶失活了。选择在有效期内、有活性的酶联物;
4、目的蛋白存在翻译后修饰或剪切体,建议查询相关文献确定;
5、标本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低,建议设置阳性对照比对结果,增加标本上样量。
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