蛋白印迹膜再生液，用于免疫印迹中转移了蛋白后膜的重复利用，可对同一张膜进行多次 Western Blot 检 测。在免疫印迹中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后，有时还需要检测表达量相对稳定的内参蛋 白作为参照，或检测其它蛋白进行比较。通过使用蛋白印迹膜再生液中特殊成份解离一抗二抗与印迹膜上抗 原的结合，在不影响抗原蛋白的情况下从而去除一抗二抗，即可非常方便地重新利用同一张膜检测其它蛋白。与重新跑SDS-PAGE 胶比较，不仅省时省力，而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。

本产品采用酸性洗涤配方，不含有β-巯基乙醇等有机试剂，能快速有效的去除结合在印迹膜上的抗体，随后可使用不同的抗体进行下一轮Western Blot实验，因而可利用同一张膜进行多次蛋白检测，适用于少量样品多次检测不同的蛋白质。即使样品量并不匮乏，采用这一方法多次检测同一张膜上的蛋白，大大节约时间，而且可以消除重新上样带来的误差。

1)将发光后的膜在 TBST 中漂洗浸泡 5 分钟。

2)弃掉 TBST ，将膜完全浸入 20ml 的蛋白印迹膜再生液(酸性无气味型)中，摇床上轻摇 10-20 分钟。（对于很强的抗原抗体复合物，应该适当延长时间或者提高孵育温度，佳条件应该实验中调整优化）

3)弃掉蛋白印迹膜再生液，使用 TBST 漂洗，摇床上轻摇 5 分钟，然后重复漂洗两次。

4)此时膜上抗体已除去，膜可以重新进行封闭和后续抗体孵育的 Western Blot 操作了。

1. 建议先检测表达量较低的目的蛋白，用洗脱液处理后检测表达量高的蛋白，如内参蛋白等。

2. 蛋白印迹膜再生液有轻度腐蚀性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。如果不小心溅入眼睛，请用大量清水冲洗。

3. 为了达到佳效果，推荐使用 PVDF 膜，本产品对 PVDF 膜使用效果更好。

4. 适用于 ECL 和类似的化学发光试剂进行的 Western检测。不适用于非化学发光试剂进行的 Western检测，例如 DAB ，NBT/BCIP。

5. 需要再生的膜如果干了，则洗脱效率非常低，因此如果决定要做膜再生，应该做完底物化学发光后，立刻将湿润状态的膜放入 PBS 中 4℃保存直到开始再生过程，尽量避免让膜干燥。

6. 使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用 BSA 封闭的膜更容易再生。

7. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。