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细胞培养中细胞生长缓慢或不生长的可能原因及解决方法
答:可能的原因包括培养基质量、血清质量、温度、pH值、气体比例等。
解决方法有:
1. 使用高质量的培养基和血清,确保其无菌、无支原体污染,并保证在保质期内使用;
2. 培养箱温度和气体比例要保持稳定,定期校准;
3. 每天检查并记录细胞培养的环境参数,如温度、pH值、气体比例等,以便及时发现问题;
4. 定期更换培养基,保持细胞营养充足;
5. 对于生长缓慢的细胞株,可以尝试进行克隆筛选或更换培养基。
二氢罗丹明123(Dihydrorhodamine 123),是一种不带电荷的非荧光染料,是罗丹明123(R123)衍生物。存在活性氧物质的情况下,细胞内的二氢罗丹明123(DHR123)氧化为荧光R123,定位在线粒体中。它是2,7-二氯二氢荧光素(DCDHF)的类似物,具有亲脂性,通过细胞膜扩散。可用于检测头肾来源巨噬细胞的细胞内自由基或ROS(活性氧物质),还用于红细胞DHR测定和中性粒细胞氧化爆发测定。
二氢罗丹明123可检测单细胞水平的超氧离子,可用于在呼吸爆发事件中探测中性粒细胞超氧化物的产生。也用于检测巨噬细胞和人类精子的氧化应激情况。二氢罗丹明123可用于检测ROS(活性氧物质)。ROS的存在可将二氢罗丹明123氧化成荧光衍生物罗丹明123。该反应可在过氧化物酶或类似催化剂存在下发生。
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答:可能的原因包括培养基质量、血清质量、温度、pH值、气体比例等。
解决方法有:
1. 使用高质量的培养基和血清,确保其无菌、无支原体污染,并保证在保质期内使用;
2. 培养箱温度和气体比例要保持稳定,定期校准;
3. 每天检查并记录细胞培养的环境参数,如温度、pH值、气体比例等,以便及时发现问题;
4. 定期更换培养基,保持细胞营养充足;
5. 对于生长缓慢的细胞株,可以尝试进行克隆筛选或更换培养基。
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