萤火虫荧光素酶 (Firefly Luciferase) 分子量约61 kDa 的蛋白，在ATP、Mg2+和 O2存在条件下，催化其底物甲虫荧光素 (Beetle Luciferin)氧化成氧化荧光素 (Oxyluciferin) 并发出波长是560 nm左右的荧光。海肾荧光素酶 (Renilla Luciferase) 是分子量约36 kDa的蛋白，在O2存在下，催化其底物腔肠素 (Coelenterazine) 氧化成Coelenteramide并放出波长480nm左右的荧光。两种荧光均属于化学发光，可以用酶标仪的化学发光检测模块进行测定。本试剂盒利用双报告基因检测的方式，其中一种报告基因（如海肾荧光素酶报告基因）可作为内对照，可有效排除因外部因素导致的误差，如细胞数量，细胞状态，移液体积，细胞裂解效率等，以实现对实验数据的准确性和可靠性。本试剂盒主要可以应用于启动子、增强子、转录因子活性研究，miRNA靶向研究，信号通路研究，蛋白质相互作用等。

1. 使用前请将产品瞬时离心至管底，再进行后续实验。

2. 萤火虫荧光素酶催化的生物发光的强波长为560nm ，海肾荧光素酶催化的生物发光的强波长为480 nm 。请用

化 学 发光（Luminescence）模块进行检测。

3. 如果体系中荧光素酶表达量较低，可适当减少裂解用量以提高蛋白浓度，同时应增加检测复孔的数量，以减少低

浓度表达造成的孔间差异，确保结果的可靠性。

4. 50 × Coelenterazine易挥发，开封使用后请注意拧紧盖子和封好封口膜保存。

5. 酶促反应对温度较为敏感，加样检测前务必将细胞裂解产物和检测底物均平衡至室温后使用。

6. 实验需要自备 PBS 试剂，若是植物样本还需自备磁珠，研钵，研磨棒，液氮。

7. 本产品仅限于科研，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品和药品，不得存放于普通住宅内。

8. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。