Trizol总RNA提取试剂盒是本公司自主研发和生产的用于细胞或组织的总RNA提取试剂。Trizol含酚和异硫 氰酸胍等物质,具有极强的裂解能力,可在短时间内裂解细胞和组织样本,并有效抑制RNase活性,从而有 效防止RNA在提取过程中的降解,保证RNA的完整性。同时本产品使用氯仿替代物替代氯仿,毒性小,操作 更安全。加入氯仿替代物离心后,溶液形成上清层为水相(无色) 、中间层、下层为有机相,上清层用异丙醇沉 淀回收总RNA,中间层用乙醇沉淀回收DNA,下层用异丙醇沉淀回收蛋白。 本产品适用于次生代谢较少的植物组织(如幼苗、幼叶等)、培养细胞、动物组织、微生物。提取过程可在 1h内完成,提取的总 RNA纯度高、完整性好,大限度的去除了蛋白质和基因组DNA等杂质,可以直接用于 RT-PCR、Northern Blot、体外翻译及mRNA纯化等实验。 本产品安全性高:使用氯仿替代物替代氯仿,毒性较小;适用范围广;操作简单省时,整个过程可在1h内 完成;提取的RNA纯度高、污染少。
1 、样品保存:加入Trizol混匀后,样品可在-70℃放置1~2 月;RNA 样品可以在70%酒精中-70℃保存 2~4 周:如果需要 长期保存,应置于超低温冰箱中保存。使用冻存的细胞或组织抽提总 RNA 的效果通常比新鲜的细胞或组织差一些。 因为在细胞或组织冻融过程中一些细胞或组织内的RNase会被释放出来并剪切样品。如果不能及时抽提RNA,推荐 先加入适量Trizol,并裂解样品后冻存。 2 、Trizol 是强腐蚀性物质,为防止溅入眼睛,请戴防护眼镜或使用透明保护屏。若不慎污染皮肤或眼睛后,立即 用清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医生的帮助。 3 、所有离心管,枪头及相关溶液都必须无 RNA酶污染。耐高温器物可150℃烘烤4小时以去除 RNA 酶,其它器物 去除RNA酶可考虑用0.01%的 DEPC 水浸泡过夜,然后灭菌,烘干。溶液需用 DEPC水配制。 4 、该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。 5 、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作,且尽量不要对着 RNA 样品说话,以防 RNA 酶污染
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答:可能的原因有:
1、胶凝的不均匀或聚合不好,建议灌胶前将溶液充分混匀;
2、某些样品盐浓度较高,建议除盐或将样品盐浓度调成一致;
3、缓冲液陈旧,成分改变,可以重配;
4、凝胶下面有气泡,电泳前要先将气泡赶走;
5、电泳时温度过高,可以降低电流或电压;
6、样品中含有不溶性颗粒,建议样品充分搅拌混匀。
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