Super Green(可替代Sybr Green)新型核酸染料是一种油性大分子,不易挥发升华,不易穿透完整细胞膜进入活体细胞内,实验显示在凝胶染色浓度下没有发现诱变性,具有使用相对安全、检测灵敏等特点,可以作为各种核酸电泳的染色剂,适用于各种片段大小染色。与标准凝胶成像系统和可见光激发的凝胶观察装置完美兼容,适用于紫外凝胶成像系统或蓝色可见光激发的凝胶观察装置。
相对安全:油性大分子特点使其不易穿透完整细胞膜进入细胞内,使用相对安全,实验显示在工作浓度(凝胶染色 浓度)下没有发现诱变性,可以代替致癌物溴化乙锭EB作为各种核酸电泳的染色剂。
灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响较小。
稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。
信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
操作简单:在预制胶和电泳过程中不降解,可直接用可见光凝胶透射仪观察。
适用范围:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可 用于dsDNA、ssDNA 或RNA 染色。
仪器兼容:适用于使用254nm 激发的紫外凝胶成像系统或蓝色可见光激发的凝胶观察装置。它和SYBR Green I的 光谱相似,灵敏度相当,但更加稳定。
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答:如果能够排除下面的几个问题,那么问题多半出现在一抗和抗原制备上。
1、二抗的HRP 活性太强,将底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不稳定,失活;
3、ECL底物没覆盖到相应位置;
4、一抗选择不当;
5、二抗失活。
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