结肠癌；雌性；C57BL/6

1） 来源: 结肠癌

2） 形态: 上皮细胞样，半贴壁半悬浮细胞

3）含量:  >1x10^6 细胞数

4） 规格:  T25 瓶或者 1mL 冻存管包装

5）用途:  仅供科研使用

（1）1mL 冻存管包装干冰运输，收 到后-80 度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏，若发现干冰已挥发干净、冻存 管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。

（2）T25 瓶复苏的存活 细胞常温发货，收到后按照细胞接收后的处理方法操作。

1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请拍照后及时联系我们。 

2）请在4或5X显微镜下确认细胞状态，同时给刚收到的细胞拍照（10×，20×）各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存，作为售后时收到时细胞状态的依据。

3）贴壁细胞：T25瓶置于37℃培养箱中约2-3h，显微镜下观察细胞的情况，若细胞密度在70%-80%左右，可进行传代，首次传代建议1:2(也可根据情况调整)，若细胞生长不足70%，建议消化处理后，转移到新的T25培养瓶（1：1）继续培养。

4）半贴细胞或贴壁不牢（悬浮）细胞：T25瓶置于37℃培养箱中约2-3h，显微镜下观察细胞的情况，若细胞密度在60%以下，客户需收集T25瓶中的悬浮细胞离心后用完全培养基重悬后打回到原培养瓶中继续培养，若细胞生长70%-90%对细胞进行传代，传代时需要收集培养基中悬浮的细胞离心后回收。

5）备注：运输用的培养基（灌注培养基）不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议T25培养瓶1：2传代 。

1）准备培养基：DMEM(包含2mM L-谷氨酰胺，0.11g / L丙酮酸钠) 培养基；优质胎牛血清 10 %；MEM NEAA非必需氨基酸 1%；HEPES 1%；P/S青霉素-链霉素 1%。

2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5% 。 温度：37 摄氏度，培养箱 湿度为 70%-80%。

3）冻存液：冻存细胞时，用FBS重悬细胞，然后加入一定量的DMSO，轻轻混合均匀后移入到冻存管中，DMSO终浓度为10%。