乳酸脱氢酶（LDH）是一种氧化还原酶（EC1.1.1.27），广泛存在于各种生物体中。它催化丙酮酸和乳酸相互转化，同时伴随着NADH 和NAD+的相互转化。细胞凋亡或坏死而造成的细胞膜结构的破坏会导致细胞浆内的酶释放到培养液里，其中包括酶活性较为稳定的乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)。通过检测从质膜破裂的细胞中释放到培养液中的LDH的活性，就可以实现对细胞毒性的定量分析。LDH释放被看做细胞膜完整性的重要指标，并被广泛用于细胞毒性检测。LDH释放被认为是以前使用放射性的51Cr标记细胞，随后通过51Cr释放进行细胞膜完整性检测的安全有效的替代方法。本试剂盒为研究细胞毒性提供了一种简便的比色测定法，其原理是基于在典型的细胞毒性测定中，将靶细胞与细胞毒性化学试剂或细胞毒性细胞（NK 细胞，细胞毒性T细胞）一起培养，以诱导靶细胞死亡和LDH释放。将含有LDH的上清液转移至新的 96 孔测定板的孔中，在乳酸脱氢酶的作用下，NAD+被还原生成NADH，NADH和INT (2-p-iodophenyl-3-nitrophenyl tetrazolium chloride)被硫辛酰胺脱氢酶(diaphorase)催化反应生成NAD+和强生色物甲臜(formazan)，在490nm波长下产生吸收峰，从而可以通过比色来定量乳酸脱氢酶的活性。吸光度与乳酸脱氢酶活性成线性正相关。本试剂盒可以用于细胞毒性检测也可用于常规的乳酸脱氢酶活性的检测。
酶标仪（能测490nm处的吸光度）及二氧化碳培养箱
96孔板，透明平底
平板离心机（可选）
可调节式移液枪及枪头
去离子水
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一旦在细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关:
(1)细胞生长过老，破碎的细胞残骸;
(2)配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长;
(3)培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除;
(4)血清等级不足以维持细胞良好的生长，更换高等级的胎牛血清。
答：细胞形态异常可能是由于支原体污染、有毒物质释放、营养不足等原因引起的。
解决方法有：
1、定期进行支原体检测，确保细胞无支原体污染；
2、检查培养基和血清的质量，避免使用过期或劣质的试剂；
3、观察细胞形态，发现异常及时采取措施，如更换培养基或使用相应的药物处理；
4、对于有毒物质释放引起的形态异常，可以尝试降低细胞密度或更换培养基。
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