
本制品是把编码细菌噬菌体P1 Cre蛋白的质粒在大肠杆菌中进行表达后,经多次纯化分离而得到的Cre重组酶。本酶无需能量辅助因子,Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡。
Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。loxP识别元件是一34bp序列,其两端是两个13 bp的反向重复序列,中间是起定向作用的8 bp间隔区。重组产物根据loxP位点的位置和相对方向而不同,两个含单loxP位点的DNA将被融合。两个正向重复loxP位点间的DNA将以环状形式切割,而两个反向loxP位点间的DNA序列将被翻转。

1)两个loxP位点之间DNA的切割;
2)含loxP位点DNA分子的融合;
3)loxP位点之间DNA序列的翻转。


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解决方案:检查荧光染料和探针质量。或增加探针\染料浓度。
解决方案:重新设计引物或优化反应体系(如Mg²⁺浓度)。
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