阿佛丁是即用型的无菌麻醉剂,其有效成分为三溴乙醇(Tribromoethanol ,TBE) ,是非管制药物, 曾被 推荐作为转基因鼠传代有关的外科手术的麻醉剂 。使用时腹腔注射,简单方便,麻醉起效时间<5min ,维持 时间在24~ 90min 范围内,仅用于啮齿类动物(小/大鼠)麻醉。
1. 麻醉剂剂量确定
称量实验动物体重,小鼠麻醉剂量按20ul/g计算; 大鼠麻醉剂量按20ml/kg计算 。无菌条件下分装适量麻醉 剂,供一次实验使用。
2. 腹腔注射
1) 注射器吸入相应体积麻醉剂;
2) 一手固定动物,腹部向上,且呈头低位;
3) 局部皮肤消毒;
4) 一手持注射器刺入下腹部皮下,针头向前推进3mm后,注射针头与皮肤面呈45 ° 角刺入腹肌。
3. 观察
1) 给药后做好保温工作,减轻动物因体温下降导致的寒颤。
2) 完全麻醉: 麻醉后动物自然倒下,头、 四肢、尾巴、胡须无触碰反应,仰卧时心跳及呼吸均匀,肌肉松弛视为达到完全麻醉状态,可进行后续实验操作。
注:
①麻醉起效时间: 注射麻醉药物至小鼠自然倒下,头、 四肢、尾巴、胡须无触碰反应,仰卧时心跳及呼吸均匀,肌肉松弛视为达到完全麻醉状态时间。
②麻醉维持时间: 从达到完全麻醉状态到有复苏反应的时间,小鼠的前肢或头开始抖动即判定为开始复苏。
1 、推荐麻醉剂量: 小鼠按 20ul/g 计算; 大鼠按 20ml/kg 计算。
2 、麻醉剂量根据不同品系、不同周龄实验动物会略有差异,可提前按照15~25ul/g从低剂量开始预实验,确定终麻醉剂量。
3 、适量无菌分装后建议 2~ 8℃避光保存 1 年或者短期存放于室温不超过三个月。
4 、如出现结晶,待恢复室温(可以在 30℃条件下) 全部溶解后再使用。
5 、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
6 、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
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答:如果能够排除下面的几个问题,那么问题多半出现在一抗和抗原制备上。
1、二抗的HRP 活性太强,将底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不稳定,失活;
3、ECL底物没覆盖到相应位置;
4、一抗选择不当;
5、二抗失活。
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