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生化——试剂盒使用过程中信号值过低或无信号
可能的原因有：
1.样本中目标物质浓度过低。
2.试剂失效或储存不当。
3.反应条件不合适（如温度、时间不足）。
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RNA提取中发现RNA难以溶解或溶解后浓度低
可能的原因有：
1.RNA沉淀过于干燥——室温干燥5-10 min即可；
2.溶解缓冲液不合适——使用RNase-free水或TE缓冲液溶解RNA、轻柔吹打或短暂加热（55℃）帮助溶解。
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RNA提取中RNA沉淀不充分（RNA沉淀难以观察或沉淀量少）
可能的原因有：
1.异丙醇或乙醇浓度不足——通常为等体积异丙醇或2.5倍体积乙醇；
2.沉淀时间不足或温度不合适——延长沉淀时间（-20℃沉淀30 min至过夜），在低温条件下离心（4℃）。
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RNA提取后发现有DNA污染
可能的原因有：
1.裂解液未能有效分离RNA和DNA——在提取过程中加入DNase I处理，降解DNA;
2.未使用DNase处理——使用专门去除DNA污染的RNA提取试剂盒。
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RNA提取后发现纯度低（A260/A280比值异常）
可能的原因有：
1.蛋白质去除不彻底——优化蛋白质去除步骤，确保充分离心分离水相和有机相；
2.有机溶剂（如苯酚、氯仿）残留——增加洗涤步骤，彻底去除有机溶剂残留。
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RNA提取后发现浓度过低
可能的原因有：
1.样本量不足或细胞/组织裂解不充分——增加样本量或优化裂解条件（如延长裂解时间或增加裂解液体积）；
2.RNA在提取过程中丢失（如沉淀不完全或洗涤过度）——确保RNA沉淀完全，避免洗涤过度；
3.样本中RNA含量低（如某些组织或细胞类型）——增加样本量。
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RNA提取后发现其降解（电泳条带不清晰、28S和18S rRNA比例异常）
可能的原因有：
1.样品处理不当（如未立即冷冻保存）——样品采集后立即液氮冷冻或放入RNA稳定剂中；
2.实验环境中RNase污染——使用RNase-free的试剂耗材、操作时戴手套、口罩等；
3.裂解不充分或操作时间过长——尽量缩短实验时间，避免反复冻融。
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质粒提取后电泳发现有杂带
可能是因为含有基因组DNA，解决办法有：
1.优化裂解步骤，避免过度裂解；
2.使用碱性裂解法时，确保中和步骤准确；
3.使用柱式提取法，选择性地结合质粒DNA。
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质粒提取后发现质粒电泳条带模糊或消失
说明其在提取过程中降解，解决办法有：
1.操作时佩戴手套，使用无核酸酶污染的试剂和耗材；
2.提取过程中避免剧烈涡旋，减少机械剪切力。
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质粒提取后发现质粒量不足
可能的原因有：
1.菌体数量少——确保细菌培养时间足够，通常为12-16 h；
2.质粒拷贝数低——使用高拷贝数质粒，低拷贝质粒需按说明书更改试剂使用量；
3.裂解不充分——优化裂解步骤，确保细菌充分裂解。
