RIPA(弱)裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的PAGE、Western、免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(co-IP)和ELISA等。
本产品可以用于动物、植物的细胞或组织样品,也可以用于真菌或细菌样品。
RIPA(弱)裂解液的主要成分为Tris(pH7.4),NaCl,1% NP-40,0.25%脱氧胆酸钠 ,以及原钒酸钠,氟化钠,EDTA,leupeptin等多种抑制剂,可以有效抑制蛋白降解。
用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
1.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
1.Zhoujia H ,Wei Z ,Lin H , et al.Kaempferol exerts antioxidant effects in age-related diminished ovarian reserve by regulating the HSP90/NRF2 pathway.[J].Chemical biology & drug design,2023,103(1):(IF 3)
2.Wei Q ,ChengShi X ,XiaoChong L , et al.Telmisartan inhibits microglia-induced neurotoxic A1 astrocyte conversion via PPARγ-mediated NF-κB/p65 degradation.[J].International immunopharmacology,2023,123110761-110761.(IF 5.6)
答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多个修饰位点,本身可以呈现多条带,建议查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小;
2、样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作;
3、杂蛋白多,建议处理目的蛋白;
4、抗体特异性不强,建议使用特异性强的抗体;
5、抗体孵育时间过久,建议减少抗体孵育时间;
6、二抗与抗原有交叉反应,建议选择合适的封闭物;
7、二聚体或多聚体存在,建议增加蛋白质变性过程及强度;
8、底物显色与曝光时间过长,建议缩短显色及曝光的时间。
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