本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取总蛋白，用裂解液匀浆裂解组织或细胞，作用温和，提取过程简便高效，可快速获得总蛋白。获得的总蛋白可用于报告基因检测、蛋白质纯化、Western Blot 、免疫共沉淀等后续研究，但不能用于蛋白激酶及磷酸酶的研究，因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂。

实体组织蛋白的提取

1.在1ml的冷裂解液中加入20ul的磷酸酶抑制剂、10ul蛋白酶抑制剂和10ulPMSF混匀，放置在冰上备用；

2. 称取0.1g的新鲜组织，放置于玻璃匀浆器的入口缓冲处，用眼科剪将组织块尽可能的剪碎，然后加入0.5- 1ml的新配置的裂解液，研磨直至没有明显的组织块，这个过程注意冰上操作；

3. 将组织匀浆液移入1.5ml预冷的EP管中，4℃12000g离心10min；

4. 吸取上清至新的预冷的离心管中，即为总蛋白提取物；

5.进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。(提取好的蛋白建议保存于-80℃，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存) 

培养细胞蛋白提取

1.裂解液的用量和配制：10⁷个细胞需要裂解液1ml，每1ml的冷裂解液中加入20ul的磷酸酶抑制剂、10ul蛋白酶抑制剂和10ulPMSF混匀，放置在冰上备用；

2. 贴壁细胞：弃去培养基，加入10ml/150mm培养板冷的PBS洗两次，弃去PBS，然后加入计算好的细胞裂解液，在冰上用细胞刮刀进行刮离细胞，将刮离的细胞裂解液移入预冷的EP管中，颠倒裂解20-30min。

3. 悬浮细胞：4℃500g~ 800g离心10min收集细胞，再用10ml/150mm培养板冷的PBS洗两次细胞，500g~ 800g离心去上清。同样按细胞数加入裂解液，涡旋10s，放置冰上裂解10min，重复3-4次；

4. 裂解完毕之后，将细胞裂解液4℃12000g离心10min，取上清为总蛋白提取物；

5. 将上清移入新的EP管中；进行蛋白定量或者变性进行蛋白实验。(提取好的蛋白建议保存于-80℃，即用即取，避免反复冻融，避免长时间储存)