检测范围:7.81-500pg/mL 灵敏度: 1.61 pg/mL
精密度:板内变异系数<10%,板间变异系数<10%
回收率:范围从 87%到 95%,平均回收率 91%
特异性:检测具有高灵敏度和优良的特异性。未观察到和人基质金属蛋白酶8(MMP8)类似物之间的显着交叉反应或干扰。
适用样本:血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物体液。
该试剂盒采用双抗夹心酶联免疫吸附法原理。酶标板预包被亲和纯化的抗人MMP-8的抗体。将含有人MMP-8 的样品或标准品加入到酶标板中,与包被抗体反应。再加入生物素标记的检测抗体,并与酶标板上捕获的人MMP-8结合。接着,加入链霉亲和素-辣根过氧化物酶(SA-HRP)以形成固相抗体-人MMP-8-生物素标记抗体-SA-HRP的夹心复合物。然后,将TMB溶液加入孔中并进行孵育,酶促反应产生蓝色物质,加入终止液后,变成黄色。在450nm 波长下测定吸光值。后通过建立标准曲线,根据OD值来计算样品中人MMP-8的浓度。
未拆封的试剂盒可在 2-8 ℃保存 6 个月;如果开封使用后,请按照下表中的条件分别保存各组分。
1. 实验过程中请穿戴实验服、口罩和乳胶手套。请按照生物实验室的国家安全规定进行实验,尤其是在检测血样或其他体液时。终止液有一定的腐蚀性,操作时请做好防护措施。
2. 本试剂盒仅用于实验室科学研究,如果本试剂盒用于临床诊断或任何其他用途,我们将不对任何后果负责。
3. 本试剂盒应在有效期内使用,并请严格按照说明书进行存储。收到试剂盒后,未开封的试剂盒可在2-8℃下保存1个月。如果试剂盒在1个月内不使用,请在收到试剂盒后,将每个组件分别存放在上表中指示的温度下。
4. 新打开的ELISA酶标板可能含有水雾样物质,此为正常现象,不会对实验结果产生任何影响。未用完的板条应立即放回装有干燥剂的铝箔袋中,重新密封并在-20℃下存储。
5. 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用;否则,可能导致结果异常。
6. 勤换吸头,避免各组分之间的交叉污染。
7. 溶解含有蛋白质溶液时,应始终避免起泡。
8. 不得重复使用稀释后的工作液。
9. 为了得到准确的实验结果,在孵育过程中,必须确保封板膜将酶标板密封。
10. 在使用自动洗板机时,添加清洗缓冲液后,在清洗步骤之间添加30秒的浸泡时间可提高分析精度。
11. 底物溶液保存过程中应为无色,加入到酶标板中之后底物溶液应从无色变为渐变蓝色。
12. 终止液应按照与加底物溶液(TMB)相同的顺序添加到酶标板中。添加终止液后,孔中溶液的颜色将从蓝色变为黄色。绿色的孔表明终止液未与底物溶液充分混合,应轻拍孔板使其混匀。
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可能原因 解决措施是
1,标准品稀释不正确。 确保标准品按照推荐方法溶解和稀释。
2,移液不准确。 定期校准移液器并检查枪头密封性。
3,反应液蒸发。 用封板膜密封酶标板。
4,洗板不彻底。 足够的洗涤次数和加入足量洗涤液。
5,孔底有异物。 读数前清洁板底。
可能原因 解决措施是
1,试剂反应不充分 确保孵育时间并按推荐温度孵育
2,试剂体积添加不足 检查移液器并严格按照操作步骤操作
3,稀释不正确 检查试剂稀释步骤
4,酶结合物失活 混合酶结合物和底物,通过显色反应检查
可能原因 解决措施是
1,酶标仪设置不正确 检查仪器波长
2,没加终止液 加入适量终止液
3,读板时等待时间太长 及时读板
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