本试剂盒采用双抗体夹心ELISA 法。用抗小鼠I-PTH抗体包被于酶标板上，实验时样品（或标准品）中的小鼠I-PTH 会与包被抗体结合。后依次加入生物素化的抗小鼠I-PTH 抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，抗小鼠 I-PTH 抗体与结合在包被抗体上的小鼠I-PTH结合，生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB 在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm 波长处测OD值，I-PTH浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中I-PTH的浓度。
酶标仪（能测 450nm 处的吸光度）
多通道移液器或自动洗板机
恒温箱、低温离心机
可调节式移液枪及枪头
去离子水
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可能原因 解决措施是
1，标准品稀释不正确。 确保标准品按照推荐方法溶解和稀释。
2，移液不准确。 定期校准移液器并检查枪头密封性。
3，反应液蒸发。 用封板膜密封酶标板。
4，洗板不彻底。 足够的洗涤次数和加入足量洗涤液。
5，孔底有异物。 读数前清洁板底。
可能原因 解决措施是
1，酶标仪设置不正确 检查仪器波长
2，没加终止液 加入适量终止液
3，读板时等待时间太长 及时读板
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