该试剂盒采用竞争抑制酶联免疫吸附法原理。酶标板预包被亲和纯化的抗 AFB1 的抗体。将待测抗原（标准品或样本）和生物素标记的抗原加入到酶标板中，它们对固相抗体进行竞争结合。接着洗涤去除未结合的物质，加入链酶亲和素-辣根过氧化物酶（SA-HRP）以形成固相抗体-生物素标记抗原-SA-HRP的复合物。然后，将 TMB 溶液加入孔中并进行孵育，酶促反应产生蓝色物质，加入终止液后，变成黄色。颜色深浅与样本中待测抗原的含量呈现负相关。在450nm波长下测定吸光值。后通过建立标准曲线，根据 OD 值来计算样品中 AFB1的浓度。

酶标仪（能测 450nm 处的吸光度）

多通道移液器或自动洗板机

恒温箱、低温离心机

可调节式移液枪及枪头

去离子水

1. 实验过程中请穿戴实验服、口罩和乳胶手套。请按照生物实验室的国家安全规定进行实验，尤其是在检测血样或其他体液时。终止液有一定的腐蚀性，操作时请做好防护措施。

2. 本试剂盒仅用于实验室科学研究，如果本试剂盒用于临床诊断或任何其他用途，我们将不对任何后果负责。

3. 本试剂盒应在有效期内使用，并请严格按照说明书进行存储。收到试剂盒后，未开封的试剂盒可在2-8℃下保存1个月。如果试剂盒在1个月内不使用，请在收到试剂盒后，将每个组件分别存放在上表中指示的温度下。

4. 新打开的ELISA酶标板可能含有水雾样物质，此为正常现象，不会对实验结果产生任何影响。未用完的板条应立即放回装有干燥剂的铝箔袋中，重新密封并在-20℃下存储。

5. 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用；否则，可能导致结果异常。

6. 勤换吸头，避免各组分之间的交叉污染。

7. 溶解含有蛋白质溶液时，应始终避免起泡。

8. 不得重复使用稀释后的工作液。

9. 为了得到准确的实验结果，在孵育过程中，必须确保封板膜将酶标板密封。

10. 在使用自动洗板机时，添加清洗缓冲液后，在清洗步骤之间添加30秒的浸泡时间可提高分析精度。

11. 底物溶液(TMB)保存过程中应为无色，加入到酶标板中之后底物溶液应从无色变为渐变蓝色。

12. 终止液应按照与加底物溶液(TMB)相同的顺序添加到酶标板中。添加终止液后，孔中溶液的颜色将从蓝色变为黄色。绿色的孔表明终止液未与底物溶液充分混合，应轻拍孔板使其混匀。