本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在微孔条上预包被偶联抗原,待测抗原(标准品或样本)中的呕吐毒素和微孔条上预包被的偶联抗原竞争呕吐毒素抗体,加入酶标记物反应后,洗涤去除未结合的物质,然后用TMB底物显色,酶促反应产生蓝色物质,加入终止液后,变成黄色。在450nm 波长下测定吸光值,样本吸光值与其所含残留物呕吐毒素的含量成负相关。后通过建立标准曲线,将样本吸光值与标准曲线比较可得出相应残留物呕吐毒素的含量。
仪器:酶标仪(能测 450nm 处的吸光度) 、旋转蒸发仪/氮气吹干装置、均质器、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g )、多通道移液器或自动洗板机、可调节式移液枪及枪头
试剂:甲醇、正己烷、滤纸
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可能原因 解决措施是
1,酶标仪设置不正确 检查仪器波长
2,没加终止液 加入适量终止液
3,读板时等待时间太长 及时读板
可能原因 解决措施是
1,标准品稀释不正确。 确保标准品按照推荐方法溶解和稀释。
2,移液不准确。 定期校准移液器并检查枪头密封性。
3,反应液蒸发。 用封板膜密封酶标板。
4,洗板不彻底。 足够的洗涤次数和加入足量洗涤液。
5,孔底有异物。 读数前清洁板底。
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