纤维素是由β-D-葡萄糖单元以β-1,4-糖苷键连接而成的直链多聚体,通常与半纤维素、果胶和木质素结合在一起,是植物细胞壁的主要结构成分。纤维素是一种重要的膳食纤维,是自然界中分布广、含量多的一种多糖。以纤维素为原料的产品广泛应用于食品、造纸、塑料、炸药、电工及科研器材等领域。本试剂盒提供了一种简单易用的比色法,用于分析生物样品中纤维素含量。其原理是纤维素在酸性条件下加热能分解成β-D-葡萄糖。β-葡萄糖在强酸作用下,可脱水生成β-糠醛类化合物,利用与蒽酮显色剂测定纤维素含量。
酶标仪或可见分光光度计(能测620nm处的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿,可调节式移液枪及枪头
去离子水,浓硫酸,80%乙醇,丙酮
制冰机,离心机,水浴锅
匀浆器
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多个修饰位点,本身可以呈现多条带,建议查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小;
2、样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作;
3、杂蛋白多,建议处理目的蛋白;
4、抗体特异性不强,建议使用特异性强的抗体;
5、抗体孵育时间过久,建议减少抗体孵育时间;
6、二抗与抗原有交叉反应,建议选择合适的封闭物;
7、二聚体或多聚体存在,建议增加蛋白质变性过程及强度;
8、底物显色与曝光时间过长,建议缩短显色及曝光的时间。
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