乙酰-β-D -葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.52,N-acetyl-β-D-glucosidase,NAG)广泛存在于各种组织、体液和细胞中,是溶酶体中的一种酸性水解酶,以前列腺和肾近曲小管细胞内含量高。NAG活性变化与机体某些病理状态密切相关,测定NAG活性可用于肾小管间质性肾炎、尿路感染、糖尿病肾病综合症、高血压肾病、肾移植后的 排异反应和肾病综合症的早期诊断。本试剂盒提供了一种简单易用的比色法,用于分析各种生物样品中NAG的活性。其原理是NAG分解N-β-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有大吸收峰,通过测定400nm下吸光度升高速率来计算NAG活性。
酶标仪或可见光分光光度计(能测400nm处的吸光度)及恒温箱
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
离心机、制冰机
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
更新中...
答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多个修饰位点,本身可以呈现多条带,建议查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小;
2、样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作;
3、杂蛋白多,建议处理目的蛋白;
4、抗体特异性不强,建议使用特异性强的抗体;
5、抗体孵育时间过久,建议减少抗体孵育时间;
6、二抗与抗原有交叉反应,建议选择合适的封闭物;
7、二聚体或多聚体存在,建议增加蛋白质变性过程及强度;
8、底物显色与曝光时间过长,建议缩短显色及曝光的时间。
Copyright ©湖北普美生物科技有限公司 All Rights Reserved. 工信部备案:鄂ICP备17001029号-1 技术支持:武汉微盟