淀粉酶负责水解淀粉，包括α-淀粉酶（α-AL，EC 3.2.1.1）和β-淀粉酶（β-AL）。α-淀粉酶随机催化淀粉中α-1,4-糖苷键水解，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖，同时使淀粉的粘度降低，因此又称为液化酶。α-淀粉酶分布十分广泛，遍及微生物乃至高等植物。本试剂盒提供了一种简单的比色法来检测生物样本中α-淀粉酶活性，其原理是淀粉水解酶催化淀粉水解生成还原糖，还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质，在540nm有吸收峰；通过测定540nm吸光度增加速率，计算淀粉酶活性。α-淀粉酶耐热，但是β-淀粉酶在70℃下15min可钝化。因此粗酶液经过70℃钝化15min，就只有α-淀粉酶能够催化淀粉水解。
酶标仪或可见光分光光度计（能测540nm处的吸光度）
水浴锅、离心机
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
去离子水
匀浆器（如果是组织样本）
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答：可能的原因有：
1、目的蛋白有多个修饰位点，本身可以呈现多条带，建议查阅文献或进行生物信息学分析，获得蛋白序列的修饰位点信息，通过去修饰确定蛋白实际大小；
2、样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂；样本处理时在冰上操作；
3、杂蛋白多，建议处理目的蛋白；
4、抗体特异性不强，建议使用特异性强的抗体；
5、抗体孵育时间过久，建议减少抗体孵育时间；
6、二抗与抗原有交叉反应，建议选择合适的封闭物；
7、二聚体或多聚体存在，建议增加蛋白质变性过程及强度；
8、底物显色与曝光时间过长，建议缩短显色及曝光的时间。
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