活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等，研究表明，机体95％以上的活性氧（ROS）都来自于线粒体，其失衡所致的氧化应激与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程有关。正常情况下，细胞内抗氧化防御系统与氧自由基处于平衡状态，细胞内活性氧（ROS）水平维持在较低的生理范围；在病理情况下，细胞内抗氧化系统与氧自由基的平衡被打破，细胞内活性氧水平过多，就可破坏线粒体酶类、脂类和核酸，使机体出现氧化应激，同时，活性氧还可攻击线粒体DNA产生氧化损伤，导致线粒体ATP合成减少、线粒体膜电位破坏等结构和功能变化。因此，通过检测活性氧的变化来判断线粒体的功能是否正常具有重要意义。本试剂盒提供了一荧光测定法，用于直接定量检测线粒体 ROS产生速率。其原理是荧光探针-还原型二氯荧光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluores cin diacetate, DCFH-DA)可扩散通过线粒体膜，在线粒体内被酯酶水解，形成无荧光的DCFH，DCFH 迅速与ROS反应生成荧光物—氧化型二氯荧光素(2', 7'-dichlo rofluorescin,DCF)。将荧光强度随时间变化的数据点拟合，线性回归直线斜率与ROS产生的速率呈正比。

荧光酶标仪或多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平

全黑96孔板、可调节式移液枪及枪头

低温离心机、制冰机

去离子水

匀浆器或研钵