谷胱甘肽是甘氨酸、谷氨酸和半胱氨酸组成的天然三肽。在红细胞中,还原型谷胱甘肽是维持血红蛋白处于还原状态的关键,保护细胞免受氧化损伤。谷胱甘肽有还原型(GSH)和氧化型(GSSG)两种形态,氧化型谷胱甘肽(GSSG)是谷胱甘肽的氧化形式,又称为二硫代谷胱甘肽,是两分子的谷胱甘肽氧化而成。GSSG会被谷胱甘肽还原酶还原成GSH,因此机体中大多数是以还原型形式存在。还原型谷胱甘肽是绝大多数活细胞中巯基的主要来源,对于维持蛋白质中巯基适当的氧化还原状态有重要作用,并且是动物细胞中关键的抗氧化剂。
测定细胞内 GSH 和 GSSG含量以及 GSH/GSSG 比值,能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态,也是谷胱甘肽氧化还原循环的主要指标之一。本试剂盒提供了一种简单的检测方法检测各种生物样本中GSH和GSSG的含量。其原理是GSH能和5,5'-二硫代-双-(2-硝基苯甲酸)(5,5'-Dithiobis-2-Nitrobenoicacid,DTNB)反应生成2-硝基-5-巯基苯甲酸,该物质为黄色,在412nm波长处具有大光吸收,来测定样本中GSH的含量。
通过2-乙烯吡啶抑制样品中原有的还原型谷胱甘肽,然后利用谷胱甘肽还原酶(Glutathione reductase,GR)将GSSG还原为GSH,借此测定氧化型谷胱甘肽的含量。
酶标仪或可见光分光光度计(能测412nm处的吸光度)及恒温箱
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
制冰机、低温离心机、去离子水、匀浆器(如果是组织样本)
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可能的原因有:
1.仪器校准不当。
2.检测波长设置错误。
3.反应孔中有气泡或杂质。
可能的原因有:
1.反应温度过高或过低。
2.试剂浓度不合适。
3.样本中目标物质浓度异常。
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