山梨醇广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,尤其广泛分布于自然界植物果实中,不仅是糖运输形式之一,而且与生物抗逆性和食物风味密切相关。山梨醇是一种用途广泛的化工原料,在食品、日化、医药等行业都有极为广泛的应用,可作为甜味剂、保湿剂、赋形剂、防腐剂等使用,同时具有多元醇的营养优势,即低热值、低糖、防龋齿等功效。因此,在糖代谢、抗逆性和食品研究中经常需要检测山梨醇含量变化。本试剂盒可检测各种生物样本中山梨醇含量,其原理是山梨醇在碱性溶液中与铜离子形成蓝色络合物,在655nm波长有特征吸收峰。在一定的浓度范围内,山梨醇含量与655nm吸光度成线性关系,测655nm处的吸光值,即可计算样品山梨醇含量。
酶标仪或可见分光光度计(能测655nm处的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿,可调节式移液枪及枪头
离心机,水浴锅
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
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答:可能的原因有:
1、目的蛋白有多个修饰位点,本身可以呈现多条带,建议查阅文献或进行生物信息学分析,获得蛋白序列的修饰位点信息,通过去修饰确定蛋白实际大小;
2、样本处理过程中目的蛋白发生降解,建议加入蛋白酶抑制剂;样本处理时在冰上操作;
3、杂蛋白多,建议处理目的蛋白;
4、抗体特异性不强,建议使用特异性强的抗体;
5、抗体孵育时间过久,建议减少抗体孵育时间;
6、二抗与抗原有交叉反应,建议选择合适的封闭物;
7、二聚体或多聚体存在,建议增加蛋白质变性过程及强度;
8、底物显色与曝光时间过长,建议缩短显色及曝光的时间。
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