丙酮酸脱氢酶(PDH;EC 1.2.4.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,分布在线粒体基质中,是由三个酶组合的复合体,负责催化丙酮酸脱羧,生成乙酰辅酶A的不可逆反应。PDH是丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)催化丙酮酸氧化脱羧的限速酶,催化丙酮酸脱羧生成羟乙基-TPP,把糖酵解和三羧酸循环连接起来。本试剂盒提供了一种简单、方便、快速的PDH活性检测方法,其原理是PDH催化丙酮酸脱氢,同时还原2,6-二氯酚靛酚(2,6-DCPIP),从而导致605nm光吸收的减少。通过检测605nm吸光值的下降既可计算PDH活性。
酶标仪或分光光度计(能测605nm处的吸光度)
96孔板或微量比色皿、可调节式移液枪及枪头
水浴锅、制冰机,低温离心机
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
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可能原因 解决措施是
1,酶标仪设置不正确 检查仪器波长
2,没加终止液 加入适量终止液
3,读板时等待时间太长 及时读板
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