己糖激酶(HK,EC 2.7.1.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,是葡萄糖分解过程中的个关键酶,催化葡萄糖转化为 6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖是糖酵解和磷酸戊糖途径的交叉点。本试剂盒可检测各种生物样本中己糖激酶(HK)活性,其原理是HK催化葡萄糖合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步催化6-磷酸葡萄糖脱氢生成NADPH,生成的NADPH将WST-8还原生成橙黄色的formazan(甲臜),在450nm左右检测有大吸收峰。通过检测450nm处光吸收增加速率来计算该酶活性。
酶标仪或可见分光光度计(能测450nm处的吸光度)及恒温培养箱
96孔板或微量玻璃比色皿、移液枪及枪头
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
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答:可能的原因有:
1、胶凝的不均匀或聚合不好,建议灌胶前将溶液充分混匀;
2、某些样品盐浓度较高,建议除盐或将样品盐浓度调成一致;
3、缓冲液陈旧,成分改变,可以重配;
4、凝胶下面有气泡,电泳前要先将气泡赶走;
5、电泳时温度过高,可以降低电流或电压;
6、样品中含有不溶性颗粒,建议样品充分搅拌混匀。
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