丙酮酸激酶（Pyruvate Kinase, PK, EC 2.7.1.40）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化糖酵解过程中的后一步反应，是糖酵解过程中的主要限速酶之一，也是产生ATP的关键酶之一，因此测定PK活性具有重要意义。本试剂盒提供了一种简单的检测方法，用于检测生物样本中PK的活性。其原理是PK催化磷酸烯醇式丙酮酸和ADP生成ATP和丙酮酸，乳酸脱氢酶进一步催化NADH和丙酮酸生成乳酸和NAD+，NADH在340nm有特征吸收峰，而NAD+没有，通过测定340nm光吸收下降速率，即可反映PK活性。
酶标仪或紫外分光光度计（能测340nm处的吸光度）及水浴锅
96孔UV板或微量石英比色皿、可调节式移液枪及枪头
低温离心机、制冰机
去离子水
匀浆器（如果是组织样本）
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答：可能的原因有：
1、胶浓度不对，不同浓度的胶跑出的蛋白条带的位置可能有所偏差，可以调整浓度；
2、抗体孵育不充分,建议增加抗体浓度，延长孵育时间；
3、酶失活，建议直接将酶和底物进行混合，如果不显色则说明酶失活了。选择在有效期内、有活性的酶联物；
4、目的蛋白存在翻译后修饰或剪切体，建议查询相关文献确定；
5、标本中不含靶蛋白或靶蛋白含量太低，建议设置阳性对照比对结果，增加标本上样量。
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