亚铁氧化酶(Hsphasetin,HP)作为铜蓝蛋白的同系物,是近年来发现的铁转运蛋白。HP催化亚铁离子(Fe2+)氧化为三价铁离子(Fe3+),在介导铁的跨膜转运中有重要作用。本试剂盒提供了一种简便的比色测定法,用于测定样本中的HP活性。其原理是以一定浓度的 Fe2+为底物,在HP的催化作用下Fe2+被氧化为Fe3+,Fe2+可与菲咯嗪形成有色复合物,在562nm处有特征吸收峰,通过测定Fe2+的减少速率可测得亚铁氧化酶的活性。
酶标仪或可见分光光度计(能测 562nm处的吸光度)
96孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头
恒温箱或水浴锅、离心机、制冰机
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
更新中...
答:如果能够排除下面的几个问题,那么问题多半出现在一抗和抗原制备上。
1、二抗的HRP 活性太强,将底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不稳定,失活;
3、ECL底物没覆盖到相应位置;
4、一抗选择不当;
5、二抗失活。
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