肉桂酸-4-羟化酶(C4H)又称反式肉桂酸-4-单氧化酶,是催化桂皮酸形成咖啡豆、香豆酸的酶。C4H多存在于高等植物、酵母、菌类中,属于细胞木质素合成途径中间的关键酶。该酶催化肉桂酸羟化作用产生4-香豆酸盐,是苯丙烷途径中继L-苯丙氨酸解氨酶之后的第二个关键酶。本试剂盒提供了一种简单、方便、快速的C4H活性检测方法,其原理是C4H催化肉桂酸和NADP生成4-香豆酸盐和NADPH,NADPH在340nm处有特征吸收峰,在340nm下测定NADPH生成速率,即可反映C4H活性。
酶标仪或紫外分光光度计(能测340nm处的吸光度)及恒温箱
96孔UV微孔板或微量石英比色皿、可调节式移液枪及枪头
制冰机、低温离心机
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
更新中...
答:如果能够排除下面的几个问题,那么问题多半出现在一抗和抗原制备上。
1、二抗的HRP 活性太强,将底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不稳定,失活;
3、ECL底物没覆盖到相应位置;
4、一抗选择不当;
5、二抗失活。
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