PEPCK(EC 4.1.1.32)广泛存在于动物、开花植物、藻类、部分真菌和细菌中。该酶催化草酰乙酸转化为磷 酸烯醇式丙酮酸,是调节糖异生途径的关键酶。本试剂盒提供了一种简单的检测方法,用于检测生物样本中PEPCK的活性。其原理是PEPCK催化草酰乙酸生成磷酸烯醇式丙酮酸和CO2,丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH氧化生成NAD+。NADH在340nm有特征吸收峰,相反NAD+在该波长无吸收峰,在340nm下测定NADH下降速率,即可反映PEPCK活性。
酶标仪或紫外分光光度计(能测340nm处的吸光度)及恒温箱
96孔UV板或微量石英比色皿、可调节式移液枪及枪头
低温离心机、制冰机
去离子水
匀浆器(如果是组织样本)
更新中...
答:如果能够排除下面的几个问题,那么问题多半出现在一抗和抗原制备上。
1、二抗的HRP 活性太强,将底物消耗光;
2、ECL底物中H2O2不稳定,失活;
3、ECL底物没覆盖到相应位置;
4、一抗选择不当;
5、二抗失活。
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